霉菌培養(yǎng)箱實(shí)驗(yàn)室作為微生物實(shí)驗(yàn)的核心設(shè)備，其運(yùn)行環(huán)境與操作規(guī)范直接影響培養(yǎng)結(jié)果的可靠性，同時(shí)關(guān)系到實(shí)驗(yàn)人員的安全。以下是必須嚴(yán)格遵守的注意事項(xiàng)。?
環(huán)境控制是首要前提。實(shí)驗(yàn)室需保持獨(dú)立空間，溫度控制在 20-25℃，相對濕度≤60%，避免與化學(xué)實(shí)驗(yàn)室或粉塵區(qū)相鄰。培養(yǎng)箱放置位置需遠(yuǎn)離門窗（距離≥1.5 米），防止陽光直射或氣流擾動導(dǎo)致箱內(nèi)溫濕度波動。室內(nèi)需安裝高效空氣過濾器（HEPA），每小時(shí)換氣 8-12 次，氣壓保持微正壓（5-10Pa），減少外界雜菌污染。實(shí)驗(yàn)臺需采用耐腐蝕環(huán)氧樹脂臺面，配備 126℃高溫消毒柜與生物安全柜，柜內(nèi)風(fēng)速維持在 0.38-0.5m/s。?
設(shè)備操作有嚴(yán)格規(guī)范。開機(jī)前需檢查水箱水位（保持在刻度線 2/3 處），使用去離子水或蒸餾水，禁止添加自來水（避免水垢堵塞加濕器）。設(shè)定參數(shù)時(shí)，溫度波動需控制在 ±0.5℃，濕度精度保持在 ±3% RH，常用培養(yǎng)條件為 28℃、85% RH。運(yùn)行中每 4 小時(shí)記錄一次數(shù)據(jù)，若發(fā)現(xiàn)濕度驟降 10% 以上，需立即檢查加濕器電極是否結(jié)垢（每月用 5% 檸檬酸清洗一次）。培養(yǎng)箱門開啟時(shí)間每次不得超過 30 秒，取放樣品需在生物安全柜內(nèi)操作，避免手部直接接觸培養(yǎng)皿邊緣。?
樣品處理需嚴(yán)防污染。培養(yǎng)基滅菌需在 121℃高壓蒸汽滅菌 20 分鐘，冷卻至 45℃時(shí)加入抗生素（如鏈霉素終濃度 50μg/mL）。接種操作前，超凈臺需紫外線照射 30 分鐘，用 75% 酒精擦拭臺面及培養(yǎng)皿外壁。樣品編號需包含日期、菌種名稱及代次，放置時(shí)保持間距≥2cm，避免堆疊遮擋氣流。若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基污染（出現(xiàn)異常菌落或顏色變化），需立即密封后高壓滅菌（121℃，30 分鐘），再按感染性廢物處理，禁止直接丟棄。?
清潔維護(hù)不可忽視。每日用 75% 酒精擦拭箱內(nèi)托盤及內(nèi)壁，每周更換一次水箱水并添加 0.1% 硫酸銅抑菌。每月校準(zhǔn)溫濕度傳感器（使用經(jīng)檢定的標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)，誤差需≤0.3℃），檢查密封條是否老化（出現(xiàn)裂紋需立即更換）。長期停用（超過 1 周）時(shí)，需排空水箱，設(shè)定 40℃烘干 2 小時(shí)，保持箱門半開狀態(tài)。過濾器濾芯每 3 個(gè)月更換一次，記錄更換日期及壓差變化（初始壓差 100Pa，超過 300Pa 必須更換）。?
應(yīng)急處理需快速響應(yīng)。若發(fā)生菌種泄漏，立即啟動應(yīng)急預(yù)案：隔離污染區(qū)域，人員撤離后關(guān)閉通風(fēng)系統(tǒng) 30 分鐘，再穿戴防護(hù)服、N95 口罩及護(hù)目鏡，用含氯消毒液（5000mg/L）噴灑消毒，作用 60 分鐘后清理。如遇培養(yǎng)箱故障停機(jī)，需在 2 小時(shí)內(nèi)將樣品轉(zhuǎn)移至備用設(shè)備，記錄停機(jī)時(shí)長（超過 4 小時(shí)的樣品需重新培養(yǎng)）。實(shí)驗(yàn)人員需每年進(jìn)行生物安全培訓(xùn)。?
